動物魚類蛋白質的測定方法
作者:祎鴻儀器 點擊率: 發(fā)布時間:2017-11-20 17:48:00
魚粉是一種重要的蛋白質原料,其安全性問題不能忽略。安全性主要體現(xiàn)在是否有藥物和有毒物質殘留,具體檢測的指標包括新鮮度、藥物殘留、衛(wèi)生指標等。魚粉的新鮮度差,會嚴重降低魚粉的品質,甚至喪失飼用價值。筆者著重討論可標識魚粉新鮮度的揮發(fā)性鹽基氮(VBN)含量的檢測。
VBN是指動物性食物由于酶和細菌的作用,
在腐敗過程中,蛋白質分解而產(chǎn)生氨以及含氮胺類物質。此類物質具有揮發(fā)性,在堿性溶液中蒸出后,用標準酸液滴定從而計算含量。本試驗根據(jù)此原理,在半微量檢測方法的基礎上改良,使檢測更簡易、快捷。
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1.11%氧化鎂混懸液
分析純氧化鎂1.0g溶于100mL蒸餾水中,振搖成混懸液。
1.22%硼酸吸收液
分析純硼酸2g溶于100mL蒸餾水。
?。保常埃保恚铮欤帖}酸標準液
吸取分析純鹽酸8.3mL,用蒸餾水定容至
?。保埃埃埃恚?,用無水碳酸鈉標定。1.40.01ml/L鹽酸標準液
用0.1mol/L鹽酸標準溶液稀釋。
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甲基紅0.1%乙醇溶液,溴甲酚綠0.5%乙醇溶液,兩溶液等體積混合,陰涼處保存3個月以內。
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?。玻?a href="http://www.qiangouduo.cn/article/type/83-1.html">全自動凱氏定氮儀2.2磁力攪拌器2.3離心機2.4消化管
?。玻档味ü茏钚》侄龋埃埃保恚蹋撤治霾襟E3.1樣品處理
稱?。保埃玺~粉(精確至±0.0001)于250mL錐形瓶中,加100mL(V總)蒸餾水,于磁力攪拌器上攪拌30min,4000r/min。
3.2蒸餾滴定
吸?。玻埃埃恚蹋玻ヅ鹚嵛找河阱F形瓶中,加混合指示劑2 ̄3滴,使KDN-2C型定氮儀的冷凝管末端浸入此溶液。準確吸取10.0mL(V分)上述樣品清液于消化管中,加少量蒸餾水沖洗,再加入10mL1%的氧化鎂溶液,蒸餾至150mL(約
5min)。吸收液立即用0.01mol/L鹽酸標準溶液滴
定,溶液由藍綠色變?yōu)榛壹t色為終點,同時做試劑空白。
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揮發(fā)性鹽基氮(W)以每100g樣品含氮mg數(shù)表示。
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(V分?。挚偅粒保埃?/div>
W-樣品中揮發(fā)性鹽基氮的含量,mg/100g;V1-測定試樣所消耗鹽酸標準溶液體積,mL;V2-試劑空白消耗鹽酸標準溶液體積,mL;C-鹽酸標準溶液的實際濃度,mol/L;
?。保矗c1.00mL標準標準滴定溶液[c(HCl)=1.000mol/L]相當?shù)牡馁|量,mg;
檢測分析
?。模澹簦澹颍恚椋睿幔簦椋铮睿幔睿洌粒睿幔欤螅椋?/div>
?。恚瓨悠焚|量,g。
結果的表述:取兩次結果的平均值,保留3位有效數(shù)字。
溫度對VBN含量的影響
磁力攪拌過程也要維持一定的溫度,溫度越高,VBN含量越大,檢驗的誤差越大(表2)。
?。翟试S差
相對誤差≤10%。
溫度VBN(mg/100g)
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20℃25℃30℃32℃
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6.1時間
?。郑拢蔚臋z測反映的是魚粉腐敗過程所產(chǎn)生的
氨以及胺類等堿性含氮物質,因此,離心后的樣液應馬上檢測。筆者以粗蛋白質含量為65%的進口秘魯魚粉為例,對比時間對VBN含量的影響(表1)。
時間
以上表明,磁力攪拌中控制溫度在20 ̄25℃最佳。
7其他
?。罚濒~粉執(zhí)行質量標準(魚粉GBT19164-2003)
主要技術參數(shù)
項目粗蛋白質/%
時間對VBN含量的影響
?。郑拢危ǎ恚纾保埃埃纾?/div>
175158133112106105
魚粉GBT19164-2003
指標
特級品一級品二級品三級品
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≥65≥60≥55≥50≤150
揮發(fā)性鹽基氮VBN(mg/100g)≤110≤130≤150
?。罚脖緳z測方法可推廣應用至其他的動物性蛋
以上表明,試液應在5min以內進行測定。
白質飼料,例如血漿蛋白粉、血球蛋白粉,等等。
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